ПЦР – что это? ПЦР или полимеразная цепная реакция – это метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные наследственные и инфекционные заболевания.

ПЦР

Метод способен обнаруживать ген инфекционного возбудителя непосредственно в исследуемом материале.

Метод ПЦР основан на способности фермента полимеразы при определенных условиях многократно удваивать фрагменты ДНК или РНК. В результате синтезируется значительное количество ДНК, которое позволяет точно идентифицировать возбудителя инфекции.

ПЦР применяется во многих областях медицины для анализов, а также в научных исследованиях.

Как делается анализ ПЦР?

ПЦР-диагностику делают в специальном аппарате – амплифакторе. В прибор помещаются пробирки с образцами биологического материала. Амплифактор настраивают на определенное количество циклов реакций, в ходе которых происходит попеременный нагрев и охлаждение пробирок.

Каждый цикл реакции проходит 3 стадии:

  • В стадии нагревания под действием высоких температур цепочка ДНК распадается на несколько фрагментов.
  • Стадия «отжига», во время которой происходит отлавливание необходимых фрагментов ДНК и спаривание их с праймерами –короткими нуклеотидными цепочками, выстроенными в определенной последовательности.
  • В стадию репликации в реакционную смесь добавляется специальный фермент – ДНК-полимераза, который используя стартовый участок ДНК как матрицу запускает реакцию удвоения (синтеза) «пойманного» участка гена.

Преимущества метода ПЦР перед другими способами диагностики инфекций

Метод ПЦР обладает высокой точностью, специфичностью и чувствительностью.

  • Методика ПЦР универсальна, для обнаружения возбудителей нескольких заболеваний достаточно исследовать один вид биологического материала человека (кровь, мочу, клетки эпителия).
  • Метод разработан с учетом выявления генома возбудителя.
  • ПЦР обнаруживает микроорганизмы, не дающие рост при бактериологических посевах. К ним относятся все вирусы, хламидии, микоплазмы и другие.
  • Метод настолько чувствительный, что способен идентифицировать возбудителя, даже, если в образце находится всего несколько молекул ДНК.
  • Большим достоинством ПЦР-исследования является то, что при его помощи выявляются возбудители инфекции, пребывающие в организме в латентном (неактивном) состоянии. Заболевание в этом случае долгое время протекает бессимптомно.

Где при помощи ПЦР-анализа можно обнаружить возбудителей инфекции?

Материалом для проведения ПЦР являются образцы различных биологических сред человека:

  • Цельная кровь или ее фракции (плазма, сыворотка). ПЦР-анализ проводится для выявления вирусов гепатитов (B C D G), герпеса, ВИЧ-инфекции, цитомегаловируса, а также при исследовании генотипа человека.
  • Моча. Методика ПЦР применяется для идентификации возбудителя при инфекционном поражении мочевыделительных путей.
  • Соскобы и мазки со слизистых оболочек. Чаще всего используется для диагностики заболеваний, передающихся половым путем: гонореи, трихомониаза и других инфекции, поражающие слизистые оболочки урогенитальных путей.
  • Биологические жидкости: спинномозговая, плевральная, суставная, секрет простаты, сперма, слюна, мокрота забираются и исследуются методом ПЦР по показаниям.
  • Биоптаты из желудка и двенадцатиперстной кишки берутся для выявления инфекции, вызываемой бактерией хеликобактер пилори.

Расшифровка анализа ПЦР

Анализ готовится 1,5-2 суток. Расшифровать результаты ПЦР достаточно просто.

Отрицательный результат показывает, что искомый инфекционный агент в представленных образцах биоматериала отсутствует.

Положительный результат ПЦР – это значит, что в организме человека обнаружены ДНК или РНК возбудителя.

Иногда, помимо самого факта присутствия того или иного возбудителя в организме, необходимо выяснить количество микроорганизмов. Это особенно важно, если речь идет о заболеваниях, вызванных условно-патогенной флорой. Кроме того, количественный анализ ПЦР необходим для правильного выбора терапевтической тактики при лечении таких заболеваний, как СПИД и вирусные гепатиты В, С.